黃曲霉毒素（Aflatoxin，AF）是食品中產(chǎn)泛存在的一種高致癌性真菌毒素，是Asperilus flavus和Asperillus parasiticus的二次代謝產(chǎn)物，黃曲霉毒素M1（Aflatoxin M1，AFM1）是動(dòng)物攝入黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）后在體內經(jīng)羥基化而形成的產(chǎn)物，主要存在于動(dòng)物的可食部分，如乳、肝、蛋類(lèi)等，其中以乳形態(tài)較為常見(jiàn)。是到目前為止所發(fā)現的毒性較大的真菌毒素。它可通過(guò)多種途徑污染食品和飼料，直接或間接進(jìn)入人類(lèi)食物鏈，威脅人類(lèi)健康和生命安全，對人體及動(dòng)物內臟器官尤其是肝臟損害嚴重，該毒素是黃曲霉和寄生曲霉中產(chǎn)毒菌株的代謝產(chǎn)物，普遍存在于霉變的糧食及糧食制品中。鑒于黃曲霉毒素對人類(lèi)的巨大危害性，我國對其在食品中的含量作了嚴格規定，其中，乳制品中黃曲霉毒素允許量為5ug/kg（即5ppb）。
黃曲霉毒素親和柱的功能基于抗原與抗體間可逆的特異性結合反應，使其可從復雜樣品基質(zhì)中特異性地回收目標化合物。上樣后，柱中以共價(jià)鍵形式偶聯(lián)在凝膠上的抗體會(huì )與抗原（即目標化合物）特異性結合，雜質(zhì)不會(huì )被結合，大部分隨樣品溶液流出小柱。通過(guò)淋洗的方式除去小柱內剩余雜質(zhì)后，使用純甲醇或其他洗脫液（根據對應產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)選擇）進(jìn)行洗脫即可得到潔凈的目標化合物溶液，可直接用于后續檢測。
黃曲霉毒素親和柱操作步驟簡(jiǎn)介：不同標準樣品的提取不太一樣，以國標 GB/T5009.22-2016 方法固體樣品為例
1.提取樣品：粉碎、稱(chēng)重5g樣品；用甲醇/水（70/30V/V）混合物將樣品高速混勻3分鐘。
2.過(guò)濾：將提取的樣品槽紋濾紙或普通濾紙過(guò)濾。準確移取 8.0mL 濾液并加入 42.0mL1%Tween-20 PBS 或1%TritionX-100PBS 稀釋?zhuān)貌ＡЮw維濾紙過(guò)濾，至濾液澄清，量取 25mL濾液備用。
3.吸附、淋洗：將免疫親和柱連接于 50.0mL 玻璃注射器下。準確將處理好的樣品濾液注入玻璃注射器中， 調節下滴速度,控制樣液以 1mL / min~3mL / min 的速度穩定下滴。待樣液滴完后（注：不要用空氣吹出殘留的液體，防止下一步出現堵柱子的現象） ,往注射器筒內加入 2× 10mL 水,以 2mL / min~4mL /min 穩定流速淋洗免疫親和柱。待水滴完后,用真空泵抽干親和柱。 準確加入 1.0mL 色譜級甲醇洗脫， 流速為 1mL/min~2mL/min（1 滴/秒），收集全部洗脫液于玻璃試管中。并收集于HPLC進(jìn)樣小瓶中。
4.測定：HPLC直接進(jìn)樣，在經(jīng)過(guò)柱分離后，被UVD光化學(xué)衍衍生器衍生化，被熒光檢測器記錄各種黃曲霉毒素的濃度。
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